2020年初，國內牛奶制品因為牧草進口成本上漲而漲價的現象引起了人們的關注。紫花是一種重要的牧草，某研究團隊擬將耐鹽基因HLAl導入紫花中培育耐鹽牧草，具體實驗流程如圖甲，圖乙是載體pCHLAl中T-DNA示意圖。回答下列問題：
（1）過程②為 基因表達載體基因表達載體的構建，是基因工程的核心，此過程還需要使用的工具是 限制性核酸內切酶（或限制酶）、DNA連接酶限制性核酸內切酶（或限制酶）、DNA連接酶。
（2）過程③常用的轉化方法是 農桿菌轉化法農桿菌轉化法，轉化是指 目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程。
（3）已知Basta是一種除草劑，則為達到培養并篩選的目的，過程④的培養基所含的成分必須有無機營養、有機營養、植物激素、Basta植物激素、Basta。
（4）過程④得到的幼苗 不一定不一定（填“一定”或“一定不”或“不一定”）含有HLAl基因，為進一步確認，可用PCR擴增的方法進行鑒定，則進行PCR反應的引物應根據 HLA1基因序列HLA1基因序列設計，PCR的原理是 DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制。
（5）要檢測目的基因是否插入到組織細胞的染色體DNA上，可采用 DNA分子雜交DNA分子雜交技術，判斷本實驗的目的是否達到，還應進行 耐鹽檢測耐鹽檢測實驗。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因表達載體；限制性核酸內切酶（或限制酶）、DNA連接酶；農桿菌轉化法；目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩定和表達的過程；植物激素、Basta；不一定；HLA1基因序列；DNA雙鏈復制；DNA分子雜交；耐鹽檢測
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/15 8:0:9組卷：7引用：2難度：0.5
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（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
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（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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