二十碳五烯酸(EPA)能促進(jìn)體內(nèi)飽和脂肪酸代謝,是人體自身不能直接從頭合成但又不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)。獲取EPA產(chǎn)品的主要途徑是從魚油等海洋漁業(yè)資源中提取。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)從海洋細(xì)菌中提取了EPA合成途徑的關(guān)鍵基因pfaB,并將其導(dǎo)入酵母菌內(nèi),通過酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)EPA,相關(guān)過程如圖所示,請(qǐng)回答下列問題:

(1)PCR技術(shù)遵循的基本原理是 DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制,在第 三三輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段(pfaB基因)。
(2)利用PCR擴(kuò)增pfaB基因時(shí),需將溫度上升到90℃后再降溫至50℃,其目的是 使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后,便于引物與模板鏈通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后,便于引物與模板鏈通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合。
(3)表達(dá)載體含有啟動(dòng)子,啟動(dòng)子是指 位于基因首端的一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶識(shí)別及結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA位于基因首端的一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶識(shí)別及結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。
(4)將pfaB-pPIC9表達(dá)載體導(dǎo)入酵母菌前,需先將表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌并進(jìn)行篩選,篩選時(shí)培養(yǎng)基中應(yīng)加入 氨芐青霉素氨芐青霉素,再將含有表達(dá)載體的大腸桿菌與酵母菌置于電轉(zhuǎn)杯中,通過電激將大腸桿菌導(dǎo)入酵母菌,該表達(dá)載體在酵母菌中不會(huì)隨著酵母菌繁殖而丟失的原因是 表達(dá)載體上含有真核生物復(fù)制原點(diǎn),能在酵母菌中復(fù)制表達(dá)載體上含有真核生物復(fù)制原點(diǎn),能在酵母菌中復(fù)制。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】DNA半保留復(fù)制;三;使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后,便于引物與模板鏈通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合;位于基因首端的一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶識(shí)別及結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA;氨芐青霉素;表達(dá)載體上含有真核生物復(fù)制原點(diǎn),能在酵母菌中復(fù)制
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/5/7 8:0:9組卷:0引用:1難度:0.6
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1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( )
A.應(yīng)根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計(jì)兩種引物 B.PCR每一循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三個(gè)過程 C.PCR結(jié)束后有靶分子的反應(yīng)單位能檢測(cè)出熒光 D.每個(gè)反應(yīng)單位中都需要加入解旋酶和耐高溫DNA聚合酶 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:7引用:2難度:0.6 -
2.科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問題:
(1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
(2)PCR過程所依據(jù)的原理是
(3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為
(4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C.人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克隆),可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是( )
A.在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān) B.凝膠中DNA分子通過染色,可以在波長300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來 C.該實(shí)驗(yàn)用到的緩沖液和酶,使用前為加快融化速度,從冰箱取出直接水浴加熱 D.電泳技術(shù)可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關(guān)系的鑒定 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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