凝乳酶是奶制品加工中經常用到的一種酶，其傳統制備方法的產量遠遠不能滿足生產需要。科學家研究利用基因工程技術生產凝乳酶，其部分環節如圖所示。
回答下列問題：
（1）從剛出生5天的小牛皺胃組織中提取總RNA，經逆轉錄逆轉錄過程獲得總cDNA。通過PCR技術可在總cDNA中專一性擴增出凝乳酶基因，原因是PCR過程中使用的引物能與凝乳酶基因的cDNA特異性結合PCR過程中使用的引物能與凝乳酶基因的cDNA特異性結合。
（2）過程①所使用的工具酶有限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶。凝乳酶基因和質粒上均有NdeI和Xhol兩種酶的識別序列，分別是-C↓ATATG-，-C↓TCGAG-。用以上兩種酶分別切割目的基因和質粒，得到的黏性末端分別為
。
（3）大腸桿菌作為凝乳酶基因受體細胞的主要優點有：繁殖快，易培養，遺傳物質較少等繁殖快，易培養，遺傳物質較少等（答出兩點）。
（4）篩選出成功導入重組質粒的大腸桿菌，經多代培養后，仍能從大腸桿菌中提取出凝乳酶基因。據此判斷，你認為凝乳酶基因是否已在大腸桿菌中成功轉化？請說明你的觀點及理由：不一定，轉化是指目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程，僅從大腸桿菌中提取到凝乳酶基因不能說明該基因是否有正常表達不一定，轉化是指目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程，僅從大腸桿菌中提取到凝乳酶基因不能說明該基因是否有正常表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄；PCR過程中使用的引物能與凝乳酶基因的cDNA特異性結合；限制酶、DNA連接酶；；繁殖快，易培養，遺傳物質較少等；不一定，轉化是指目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程，僅從大腸桿菌中提取到凝乳酶基因不能說明該基因是否有正常表達
；繁殖快，易培養，遺傳物質較少等；不一定，轉化是指目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程，僅從大腸桿菌中提取到凝乳酶基因不能說明該基因是否有正常表達【解答】
【點評】
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