Cre酶是一種重組酶，LoxP是能被Cre酶識別的特異DNA序列。Cre/LoxP重組酶系統能夠實現特異位點的基因敲除、基因插入等操作。
（1）一般而言，當一條DNA鏈上存在兩個相同的LoxP序列且方向相同時，Cre酶能有效切除兩個位點間的DNA序列，如圖1所示。
①Cre酶與限制酶的功能類似，能將特定部位的兩個核苷酸之間的 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵斷開。
②在無Cre酶存在的細胞中，轉錄終止信號序列抑制下游GFP基因起作用，無法發出熒光。若細胞中含有Cre酶，Cre酶就會 切除轉錄終止信號序列切除轉錄終止信號序列，GFP基因就會 轉錄和翻譯（或“表達“）轉錄和翻譯（或“表達“），合成綠色熒光蛋白。
（2）當細胞中存在多對Cre酶識別位點和熒光基因時，只有在啟動子之后且與啟動子相鄰的熒光蛋白基因才會表達，借助大腦成像技術，通過熒光蛋白“點亮”大腦內的神經元，小鼠不同的腦組織細胞就會呈現不同的顏色，出現“腦彩虹”。
①研究者利用 限制酶和DNA連接限制酶和DNA連接酶構建了含有熒光蛋白基因和Cre酶識別序列的基因表達載體（如圖2），利用 顯微注射顯微注射法將其導入小鼠細胞中，進而培育出轉基因小鼠。
②若該小鼠腦細胞中不存在Cre酶，小鼠腦組織呈現的色彩為 綠色綠色。
③若該小鼠腦細胞中存在Cre酶時，該小鼠一個腦細胞的色彩為 綠色或紅色或黃色或藍色綠色或紅色或黃色或藍色。
（3）兩個LoxP序列位于一條DNA鏈上且方向相反時，Cre酶能誘導兩個LoxP位點間的序列翻轉。請在圖3中畫出僅通過序列翻轉就能在腦組織中同時呈現四種顏色的基因表達載體模式圖（用最少的LoxP序列）。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】磷酸二酯鍵；切除轉錄終止信號序列；轉錄和翻譯（或“表達“）；限制酶和DNA連接；顯微注射；綠色；綠色或紅色或黃色或藍色
【解答】
【點評】
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