α1-抗胰蛋白酶是肝臟細(xì)胞合成的一種糖蛋白，人體缺乏α1-抗胰蛋白酶會(huì)導(dǎo)致肺氣腫。科研人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)成功培育出轉(zhuǎn)基因羊，培育過(guò)程如圖所示。這種轉(zhuǎn)基因羊進(jìn)入泌乳期后，其乳汁中含有人類的α1-抗胰蛋白酶，分離、提取羊乳中的α1-抗胰蛋白酶可用于治療肺氣腫。回答下列問(wèn)題：

（1）獲取α1-抗胰蛋白酶基因的mRNA后，通常采用

反轉(zhuǎn)錄

反轉(zhuǎn)錄

法獲取α1-抗胰蛋白酶基因，與基因組文庫(kù)中的基因相比，該方法獲取的目的基因在結(jié)構(gòu)上的特點(diǎn)是

沒有內(nèi)含子、啟動(dòng)子和終止子等序列

沒有內(nèi)含子、啟動(dòng)子和終止子等序列

。
（2）利用PCR技術(shù)可對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，若對(duì)一個(gè)目的基因擴(kuò)增n代，則需消耗

2ⁿ–1

2ⁿ–1

對(duì)引物，若目的基因序列中沒有相應(yīng)的限制酶切割位點(diǎn)，可以采用的措施是

在設(shè)計(jì)引物時(shí)將相應(yīng)限制酶的識(shí)別序列設(shè)計(jì)在引物中，然后進(jìn)行擴(kuò)增目的基因即可

在設(shè)計(jì)引物時(shí)將相應(yīng)限制酶的識(shí)別序列設(shè)計(jì)在引物中，然后進(jìn)行擴(kuò)增目的基因即可

。
（3）對(duì)用電刺激等方法取出的公羊精子，采用

培養(yǎng)法或化學(xué)誘導(dǎo)法

培養(yǎng)法或化學(xué)誘導(dǎo)法

等方法對(duì)精子進(jìn)行獲能處理，最后在受精溶液中完成受精過(guò)程。與其他體細(xì)胞相比，受精卵是導(dǎo)入基因表達(dá)載體的最佳受體細(xì)胞，原因是

受精卵大，易操作；全能性最高（最容易發(fā)育成胚胎和個(gè)體）

受精卵大，易操作；全能性最高（最容易發(fā)育成胚胎和個(gè)體）

。對(duì)培養(yǎng)的早期胚胎進(jìn)行性別鑒定后，可在桑葚胚或囊胚期進(jìn)行胚胎移植，胚胎移植的本質(zhì)是

早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移

早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移

。
（4）若要制備單克隆抗體，制備過(guò)程中用到了小羊的骨髓瘤細(xì)胞，這是因?yàn)樵摷?xì)胞具有

無(wú)限增殖

無(wú)限增殖

的特點(diǎn)。在對(duì)抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)，要先將培養(yǎng)液中的細(xì)胞濃度稀釋到3～10個(gè)/mL，然后在多孔細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中只能加入0.1mL細(xì)胞稀釋液，絕對(duì)不能多加，原因是

使每個(gè)孔內(nèi)的細(xì)胞不多于一個(gè)，從而達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的

使每個(gè)孔內(nèi)的細(xì)胞不多于一個(gè)，從而達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的

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