某單子葉作物甲不具有抗銹病的性狀，科學家將某種生物的抗銹病基因分離出來，并將該基因導入作物甲體內，成功培育了抗銹病的新品種。圖中EoRⅠ、BamHⅠ為兩種限制酶，箭頭所指為限制酶的酶切位點。已知作物甲細胞對四環素敏感，抗銹病基因可以通過EeoRⅠ或BamHⅠ獲得?；卮鹣铝袉栴}：
（1）應使用 DNA連接DNA連接酶和限制酶 EcoRIEcoRI（填“EcoRⅠ”或“BamHⅠ”）構建重組質粒，不使用另一種限制酶的理由是 BamHⅠ的酶切位點不在啟動子和終止子之間BamHⅠ的酶切位點不在啟動子和終止子之間。
（2）在獲得抗銹病基因后，采用 PCRPCR技術在體外進行大量擴增，該技術的前提是需要有一段已知抗銹病基因的核苷酸序列，以便根據該序列合成 引物引物。
（3）將抗銹病基因導入作物甲的細胞中一般不適合采用農桿菌轉化法，其原因最可能是 作物甲是單子葉植物，農桿菌不易感染單子葉植物作物甲是單子葉植物，農桿菌不易感染單子葉植物。
（4）為了初步檢測作物甲的細胞中是否導入了抗銹病基因，可以在培養基中添加 四環素四環素，若在該培養基上作物甲細胞能增殖或不死亡，則說明作物甲細胞中 可能可能（填“一定”“可能”或“一定沒有”）導入了抗銹病基因。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】DNA連接；EcoRI；BamHⅠ的酶切位點不在啟動子和終止子之間；PCR；引物；作物甲是單子葉植物，農桿菌不易感染單子葉植物；四環素；可能
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：8引用：2難度：0.5
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6