[選修3:現代生物科技專題]
研究發現,某些植物的種子脫水數十年后復水仍能夠恢復活性,原因是細胞中積累了海藻糖??蒲腥藛T擬將酵母菌的海藻糖合成酶基因(TPS)轉入小麥中。如圖中標注了載體、Bar體記基因(抗除草劑基因)、TPS基因的酶切位點和預期的基因表達載體的結構。
科研人員利用PCR技術獲得大量的TPS基因?,F將2種引物的一側添加限制酶識別序列(表格列舉了限制酶的識別序列),這樣TPS基因的PCR產物和載體用相同的限制酶切制后,可利用DNA連接酶將TPS基因拼接到載體的切口處,形成基因表達載體。
酶 | BamHⅠ | SacⅠ | HindⅢ | XbaⅠ |
識別序列 | 5′-GGATCC | 5′-GAGCTC | 5′-AAGCTT | 5′-TCTAGA |

(1)據圖分析,在TPS基因兩側引入的是
BamHⅠ、SacⅠ
BamHⅠ、SacⅠ
限制酶的酶切位點。設計的引物序列為 5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT
5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT
。(2)在利用農桿菌轉化法轉入目的基因時,需將TPS基因插入到質粒的T-DNA中,原因是
T-DNA能轉移并整合到小麥染色體DNA上
T-DNA能轉移并整合到小麥染色體DNA上
。將攜帶了TPS基因的農桿菌和小麥薄壁組織細胞共同培養時,需用酚類化合物對小麥細胞進行處理,這種處理的作用是 吸引農桿菌對小麥細胞進行侵染
吸引農桿菌對小麥細胞進行侵染
。(3)為了鑒別受體細胞中是否含有TPS基因,基因表達載體轉入細胞后,在獲得的小麥植株葉片上涂抹
除草劑
除草劑
(填“除草劑”或“海藻糖“),篩選出抗除草劑個體??茖W家將生長健壯、苗齡一致的抗除草劑小麥植株(實驗組)與非抗除草劑小麥植株(對照組)進行培育,鑒定兩組個體之間的 海藻糖
海藻糖
(填“除草劑”或“海藻糖”)的含量,如果 實驗組積累的海藻糖明顯高于對照組
實驗組積累的海藻糖明顯高于對照組
,則說明獲得了細胞中積累了海藻糖的小麥優質品種。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】BamHⅠ、SacⅠ;5'-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5'-GAGCTCAGCCTAACGTA-CAAGTTCGT;T-DNA能轉移并整合到小麥染色體DNA上;吸引農桿菌對小麥細胞進行侵染;除草劑;海藻糖;實驗組積累的海藻糖明顯高于對照組
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:3難度:0.6
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