中國農業大學國家玉米改良中心采用基因工程技術將從A生物分離出的抗蟲基因導入玉米細胞，培育出的抗蟲玉米ND207能夠抗玉米螟、黏蟲、棉鈴蟲等玉米主要鱗翅目害蟲，并能有效減輕草地貪夜蛾帶來的危害。回答下列問題。
基因工程的操作程序主要包括四個步驟：
（1）第一步：

目的基因的獲取

目的基因的獲取

。人從蘇云金芽孢桿菌中切割抗蟲基因所用的工具是限制酶，主要存在于

原核生物

原核生物

中，其特點是

能識別特定的脫氧核苷酸序列并在特定位點切斷DNA

能識別特定的脫氧核苷酸序列并在特定位點切斷DNA

。
（2）第二步：

基因表達載體的構建

基因表達載體的構建

。一個基因表達載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動子、

終止子

終止子

以及標記基因。標記基因的作用是

重組DNA的鑒定和選擇（鑒別受體細胞中是否含有目的基因，并加以篩選）

重組DNA的鑒定和選擇（鑒別受體細胞中是否含有目的基因，并加以篩選）

。
（3）第三步：

將目的基因導入受體細胞

將目的基因導入受體細胞

。將目的基因導入植物細胞采用的方法是

農桿菌轉化法

農桿菌轉化法

；將目的基因導入動物細胞采用最多的方法是

顯微注射法

顯微注射法

；將目的基因導入微生物細胞以大腸桿菌應用最為廣泛，大腸桿菌細胞最常用的轉化方法是：先用

鈣離子（氯化鈣）

鈣離子（氯化鈣）

處理細胞，使細胞處于一種能吸收環境中DNA的生理狀態，這種狀態的細胞被稱作感受態細胞。
第四步：目的基因的檢測與鑒定。