研究小組發現野生型菌株經過突變后可能失去合成某種營養物質的能力，稱為營養缺陷型菌株，只有在基本培養基中補充所缺乏的營養物質后才能生長。根據其無法合成的物質種類可分為氨基酸缺陷型菌株、維生素缺陷型菌株和堿基缺陷型菌株等。請完成以下獲得營養缺陷型菌株的步驟：
【誘變處理】用紫外線誘變野生型大腸桿菌；
【選出缺陷型】限量培養法可用于營養缺陷型菌株的檢出，其原理是野生型菌株在限量培養基上獲取營養物質的能力強于營養缺陷型菌株，如圖甲所示，其中菌落

B

B

（填“A”或“B”）即為檢出的營養缺陷型大腸桿菌菌株。該方法中還得將一個未接種的平板同時放在恒溫培養箱中培養，其目的是

作為空白對照，判斷培養基本身是否被雜菌污染

作為空白對照，判斷培養基本身是否被雜菌污染

。從功能上看，限量培養基屬于一種

選擇

選擇

培養基。

【鑒定缺陷型】利用生長圖譜法可初步確定檢出的營養缺陷型大腸桿菌的類型，即在基本培養基乙的A-E這5個區域中分別添加不同的營養物質，然后用

稀釋涂布平板

稀釋涂布平板

法將檢出的營養缺陷型大腸桿菌接種在乙上，若培養一段時間后在乙的BC交界處長出了菌落，則說明該菌株是

氨基酸和維生素

氨基酸和維生素

營養缺陷型菌。
【鑒定缺陷亞型】研究小組用上述方法鑒定了某菌株屬于維生素營養缺陷型，為了進一步確定該菌株的具體類型，他們把15種維生素按照不同組合分為5個小組，分別添加與圖丙培養基的對應區域，然后接種菌株后培養一段時間。

組別	維生素組合
1	維生素A	維生素B1	維生素B2	維生素B6	維生素B12
2	維生素C	維生素B1	維生素D2	維生素E	煙酰胺
3	葉酸	維生素B2	維生素D2	膽堿	泛酸鈣
4	對氨基苯甲酸	維生素B6	維生素E	膽堿	肌醇
5	生物素	維生素B12	煙酰胺	泛酸鈣	肌醇

若觀察到區域1和區域2產生菌落，則該營養缺陷型大腸桿菌不能合成的維生素是

維生素B1

維生素B1

；若菌株為葉酸和生物素的雙營養缺陷型大腸桿菌，則其在丙培養基上形成菌落的位置是

區域3與區域5的交界處

區域3與區域5的交界處

。