常見的探針有核酸探針和蛋白質探針。兩種探針結構和功能均不相同，故而應用在不同的檢測中。而兩種探針的制備過程中所應用的技術也不相同。請回答下列問題。
Ⅰ、蛋白質探針的制備。
（1）蛋白質探針常用 單克隆抗體單克隆抗體技術來制備。該技術的基本流程是將 特定的抗原特定的抗原注射給實驗動物，獲取的脾細胞與骨髓瘤細胞融合后，用HAT培養基篩選培養對象。該篩選過程得到的雜交瘤細胞是產生 抗體抗體的雜交瘤細胞，接下來要經過 抗體抗體檢測來獲得產生特定蛋白的雜交瘤細胞。最終將純化得到的特定蛋白結合上熒光或放射性標記，即為蛋白質探針。
（2）上述HAT培養基是 液體液體（填“液體”或“固體”）培養基。融合成雜交瘤細胞后再檢測尋找產生特定目標蛋白的雜交瘤細胞，而不直接在脾細胞中尋找產生特定蛋白的B淋巴細胞的原因是 B淋巴細胞不能分裂，不具備克隆化的能力，培養產生的抗體濃度低，不足以檢測B淋巴細胞不能分裂，不具備克隆化的能力，培養產生的抗體濃度低，不足以檢測。
Ⅱ、不對稱PCR是利用不等量的一對引物來產生大量單鏈DNA（ssDNA）的方法。該方法制備的ssDNA結合上熒光或放射性標記，即為核酸探針。
（3）不對稱PCR中加入的一對引物中含量較少的被稱為限制性引物，含量較多的被稱為非限制性引物。兩者的比例通常為1：100。PCR反應的最初的若干次循環中，其擴增產物主要是雙鏈DNA（dsDNA），但當限制性引物消耗完后，就會產生大量的ssDNA。據下圖可知，最后大量獲得的ssDNA是圖中的 甲甲（填“甲”或“乙”）鏈。
（4）若反應最初有a個模板DNA分子，最初的6次循環擴增產生dsDNA，后10個循環均只擴增ssDNA，則需要限制性引物 （27-2）a2（27-2）a2個。請繪制這16個循環中ssDNA的分子數量隨循環次數的變化圖2。（說明：縱軸的刻度請自行標注。）
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【考點】單克隆抗體及其應用；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】單克隆抗體；特定的抗原；抗體；抗體；液體；B淋巴細胞不能分裂，不具備克隆化的能力，培養產生的抗體濃度低，不足以檢測；甲；
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【解答】
【點評】
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發布：2024/9/12 1:0:10組卷：2引用：1難度：0.5
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（1）與植物體細胞雜交相比，圖2中過程②特有的誘導融合的方法是，過程②選用的骨髓瘤細胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養基上生長。
（2）對③篩選出的雜交瘤細胞，還需進行和，才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產生特異性抗體的雜交瘤細胞。與傳統血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優點是（答出一點）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內需要經過次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細胞。體外培養到一定時期的單克隆雜交—雜交瘤細胞會因為、有害代謝物的積累和培養液中營養物質缺乏等因素而分裂受阻，需進行傳代培養。
（4）與直接使用長春堿相比，將長春堿與雙特異性單克隆抗體結合后給藥，對人體的副作用更小，原因是。發布：2024/12/31 1:30:1組卷：21難度：0.5