玉米是我國重要的糧食作物和飼料來源，低溫會影響玉米的產量和品質。研究者將從微生物中獲得的CSP（冷激蛋白）基因與玉米基因的ubi啟動子相連后構建基因表達載體，并將其導入玉米細胞中，獲得了具有低溫耐受性的玉米植株，如圖1所示。請回答：
（1）研究者提取玉米的DNA，可利用PCRPCR技術將ubi啟動子擴增出來。圖1所示過程①需限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶的催化，獲得的ubi-CSP基因在構建基因表達載體時須插入到T-DNA片段中的原因是只有T-DNA片段可整合到植物的染色體上只有T-DNA片段可整合到植物的染色體上。
（2）過程②需要用CaCl2溶液CaCl2溶液處理農桿菌以利于重組DNA的導入。影響過程③的因素主要有農桿菌的種類、外植體的類型及狀態、共培養的時間等農桿菌的種類、外植體的類型及狀態、共培養的時間等，一般來說只有處于細胞周期S期S期（時期）的細胞才具有被轉化的能力。為了減小農桿菌對愈傷組織再分化的影響，需要在培養基中添加抗生素抗生素。
（3）研究者分別提取了野生型玉米及5株轉基因玉米的染色體DNA，用限制性核酸內切酶處理后進行電泳。電泳后的DNA與基因探針進行雜交，得到圖2所示放射性檢測結果，該結果表明第1、2、4、51、2、4、5株CSP基因已整合到玉米染色體基因組。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；限制酶和DNA連接酶；只有T-DNA片段可整合到植物的染色體上；CaCl2溶液；農桿菌的種類、外植體的類型及狀態、共培養的時間等；S期；抗生素；1、2、4、5
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：24引用：1難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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