內皮素（ET）是一種多肽，主要通過與靶細胞膜上的ET受體（ETA）結合而發揮生物學效應．科研人員通過構建表達載體，實現ETA基因在大腸桿菌細胞中的高效表達，其過程如下圖所示，圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的識別序列為
，限制酶XhoⅠ的識別序列為
．請據圖分析回答：
（1）進行過程①時，需要加入緩沖液、引物、dNTP和 反轉錄（逆轉錄）反轉錄（逆轉錄）酶等．完成過程①②③的目的是 獲取目的基因（ETA基因）獲取目的基因（ETA基因）．
（2）過程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使 磷酸二酯磷酸二酯鍵斷開，形成的黏性末端是 
．
（3）構建的重組表達載體，目的基因上游的啟動子是 RNA聚合酶識別和結合RNA聚合酶識別和結合的部位，進而可驅動基因的轉錄．除圖中已標出的結構外，基因表達載體還應具有的結構是 終止子終止子．
（4）過程⑥要用CaCl2預先處理大腸桿菌，使其成為容易吸收外界DNA的 感受態感受態細胞．
（5）將SNAP基因與ETA基因結合構成融合基因，其目的是有利于檢測 ETA基因能否表達及表達量ETA基因能否表達及表達量．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】反轉錄（逆轉錄）；獲取目的基因（ETA基因）；磷酸二酯；；RNA聚合酶識別和結合；終止子；感受態；ETA基因能否表達及表達量
；RNA聚合酶識別和結合；終止子；感受態；ETA基因能否表達及表達量【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：305引用：8難度：0.5
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發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6