玉米具有一定抗鹽堿能力和抗低溫能力，這與其抗逆性基因M有關。為研究基因M轉入水稻后在逆境脅迫應答中的重要作用，科學家做了如下實驗：首先將基因M和綠色熒光蛋白基因重組得到目的基因，該基因的兩端同時擁有HindⅢ和BamHⅠ切點，隨后將目的基因導入水稻并測定了基因M在水稻中的表達水平。
（1）當用圖1所示質粒與目的基因構建重組質粒時，最合適的限制酶是 BamHIBamHI。
（2）根據圖2，宜選擇玉米的 葉葉（填器官名稱）提取mRNA，然后在體外通過 逆轉錄（或反轉錄）逆轉錄（或反轉錄）的方式獲得玉米抗逆性基因M，再用 PCRPCR技術擴增，該技術的簡要步驟是 變性、復性、延伸變性、復性、延伸。
（3）將重組質粒導入水稻幼胚，加入含有 潮霉素潮霉素的培養基篩選，提取培養后的水稻幼胚DNA，設計引物對目的基因進行電泳鑒定，通過圖3結果可知1、6、7、9、10、111、6、7、9、10、11號水稻材料已成功插入目的基因。研究人員又用顯微鏡觀察轉基因水稻細胞，發出綠色熒光的相應植株為目的植株，依據圖4結果，后續還需進行的實驗步驟為 將目的植株移栽到常溫、一定濃度梯度的NaCl溶液中繼續培養，篩選出耐鹽效果最佳的植株將目的植株移栽到常溫、一定濃度梯度的NaCl溶液中繼續培養，篩選出耐鹽效果最佳的植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BamHI；葉；逆轉錄（或反轉錄）；PCR；變性、復性、延伸；潮霉素；1、6、7、9、10、11；將目的植株移栽到常溫、一定濃度梯度的NaCl溶液中繼續培養，篩選出耐鹽效果最佳的植株
【解答】
【點評】
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