乙肝由乙型肝炎病毒(HBV)引起。我國科學家由于在此領域做出重要貢獻而獲得了布隆伯格獎。
(l) HBV由一層包膜和一個含DNA分子的核衣殼組成,包膜上pre-SI區域是病毒進入細胞的關鍵結構。HBV能感染的動物只有人、猩猩和樹鼩,且只能侵染肝細胞,原因是 人、猩猩和樹鼩的肝細胞表面有HBV受體人、猩猩和樹鼩的肝細胞表面有HBV受體。
(2)將樹鼩肝臟細胞剪碎后經 胰蛋白酶、膠原蛋白酶胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理進行體外培養,加入 pre-SIpre-SI肽段后經檢測確定細胞膜上與該肽段特異性結合的是NTCP蛋白。
(3)人的NTCP也可與該肽段特異性結合。為驗證NTCP在肝細胞感染HBV中的作用,設計一種能與NTCP的mRNA互補結合的siRNA,加入可被HBV侵染的人HepaRG細胞中(如圖1),先后檢測HBV侵染前細胞中NTCP mRNA量、HBV侵染細胞一段時間后HBV的RNA量,結果如圖2。

①加入siRNA的目的是 與NTCPmRNA結合后抑制翻譯(抑制表達)與NTCPmRNA結合后抑制翻譯(抑制表達)。甲組(對照組)細胞中加入的是等量 不與NTCPmRNA互補結合的RNA不與NTCPmRNA互補結合的RNA。
②實驗表明NTCP是肝細胞感染HBV的關鍵受體,判斷依據是 乙組的NTCPmRNA含量和HBV的RNA含量均明顯低于甲組,即siRNA抑制NTCP表達時HBV的感染率也降低乙組的NTCPmRNA含量和HBV的RNA含量均明顯低于甲組,即siRNA抑制NTCP表達時HBV的感染率也降低。
(4)為進一步驗證上述結論,利用不易被HBV感染的HepG2細胞進行實驗(如圖3)。
①表中a、b處分別為 含NTCP基因的質粒、不加入含NTCP基因的質粒、不加入。
組別 | 實驗材料 | 實驗處理 | |
導入受體細胞的質粒 | 抑制HBV感染的藥物 | ||
1 | HepG2細胞 | 空質粒 | b |
2 | a | 不加入 | |
3 | 加入 |
【答案】人、猩猩和樹鼩的肝細胞表面有HBV受體;胰蛋白酶、膠原蛋白酶;pre-SI;與NTCPmRNA結合后抑制翻譯(抑制表達);不與NTCPmRNA互補結合的RNA;乙組的NTCPmRNA含量和HBV的RNA含量均明顯低于甲組,即siRNA抑制NTCP表達時HBV的感染率也降低;含NTCP基因的質粒、不加入
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/5 8:0:7組卷:20引用:1難度:0.4
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