乳鐵蛋白屬于轉鐵蛋白,是乳汁中主要的鐵結合蛋白,具有免疫以及參與調節鐵代謝和細胞生長等功能。由于人乳的來源有限,不可能通過直接提取的方法來大量獲得人乳鐵蛋白,所以科研人員將人乳鐵蛋白基因進行異源表達(在其他生物體的組織細胞中表達)?;卮鹣铝袉栴}:
(1)科研人員首先從人體的 乳腺乳腺組織細胞中獲取乳鐵蛋白的mRNA,并通過 逆轉錄逆轉錄獲得乳鐵蛋白的cDNA,該cDNA不含內含子的原因是 成熟的mRNA中不含內含子的轉錄區段(mRNA在加工過程中切除了內含子的轉錄區段)成熟的mRNA中不含內含子的轉錄區段(mRNA在加工過程中切除了內含子的轉錄區段)。
(2)將獲得的人乳鐵蛋白的cDNA采用PCR技術進行大量擴增。PCR擴增乳鐵蛋白基因的前提是 已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列,PCR每次循環可分為 變性、復性和延伸變性、復性和延伸三步。PCR反應所需的酶是 熱穩定DNA聚合酶(Taq酶)熱穩定DNA聚合酶(Taq酶)。
(3)在人乳鐵蛋白基因與質粒構建成的基因表達載體中,為了控制人乳鐵蛋白基因轉錄,在該基因的前后端應分別構建 啟動子、終止子啟動子、終止子等元件。通過顯微注射法將基因表達載體導入小鼠的睪丸中,將該小鼠與正常母鼠交配獲得陽性(含目的基因)子代,陽性子代中只有一半能產生人乳鐵蛋白,原因可能是 陽性子代中只有雌性個體能產生人乳鐵蛋白陽性子代中只有雌性個體能產生人乳鐵蛋白。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】乳腺;逆轉錄;成熟的mRNA中不含內含子的轉錄區段(mRNA在加工過程中切除了內含子的轉錄區段);已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列;變性、復性和延伸;熱穩定DNA聚合酶(Taq酶);啟動子、終止子;陽性子代中只有雌性個體能產生人乳鐵蛋白
【解答】
【點評】
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發布:2024/4/20 14:35:0組卷:8引用:4難度:0.7
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