腦血栓是威脅人類健康的常見疾病，研究發現人體內的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥。通過基因工程技術可以大量制備基因工程藥物t-PA。
（1）研究人員采用PCR技術可以獲得大量t-PA基因，PCR的原理是 DNA半保留復制DNA半保留復制，此外，除上述外獲得t-PA基因的方法還有 人工合成（或從基因文庫中獲取）人工合成（或從基因文庫中獲取）（答出1種即可）。
（2）研究表明，為心梗患者注射大量t-PA會誘發顱內出血，其原因在于t-PA與纖維蛋白結合的特異性不高，若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血副作用。據此，先對天然的t-PA基因進行序列改造，然后再采取傳統的基因工程方法表達該改造后的基因，可制造出性能優異的改良t-PA蛋白。（注：如圖乙表示相關的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質粒，新霉素為抗生素。）請回答下列問題：
①以上制造出性能優異的改良t-PA蛋白的過程被稱為 蛋白質工程蛋白質工程。已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA，而絲氨酸的密碼子為UCU，因此改造后的基因決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應設計為 AGAAGA。
②如圖所示，需選用限制酶XmaⅠ和 BglⅡBglⅡ切開質粒pCLY11，才能與t-PA改良基因高效連接。與單一酶酶切相比，本操作采用的雙酶切方法的優點是 防止載體和目的基因自身環化以及目的基因和質粒反向連接防止載體和目的基因自身環化以及目的基因和質粒反向連接。
（3）將連接好的質粒DNA導入大腸桿菌，含t-PA改良基因重組質粒的細胞應具有的性狀是 CC。
A．新霉素抗性且呈藍色
B．新霉素敏感且呈藍色
C．新霉素抗性且呈白色
D．新霉素敏感且呈白色
【答案】DNA半保留復制；人工合成（或從基因文庫中獲取）；蛋白質工程；AGA；BglⅡ；防止載體和目的基因自身環化以及目的基因和質粒反向連接；C
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/2 8:0:8組卷：19引用：3難度：0.5
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1．數字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質工程”）。可利用定點突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉基因植物。
（2）PCR過程所依據的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發現培育的該轉基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
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3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
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