科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。但在進(jìn)行基因工程的操作過(guò)程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一G↓GATCC一,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一↓GATC-,請(qǐng)據(jù)圖回答:

(1)在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程中,應(yīng)用限制酶ⅠⅠ切割質(zhì)粒,用限制酶ⅡⅡ切割目的基因。用限制酶切割目的基因和載體后形成的黏性末端通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則進(jìn)行連接。
(2)在過(guò)程③中一般將受體大腸桿菌用CaCl2CaCl2進(jìn)行處理,以增大細(xì)胞壁細(xì)胞壁的通透性,使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進(jìn)入受體細(xì)胞。
(3)將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,得到如圖a所示的結(jié)果(圓點(diǎn)表示菌落),該結(jié)果說(shuō)明能夠生長(zhǎng)的大腸桿菌中已導(dǎo)入了普通質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒普通質(zhì)粒或重組質(zhì)粒,反之則沒(méi)有導(dǎo)入;再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基a上,使絨布表面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖b所示的結(jié)果(圓圈表示與圖a中培養(yǎng)基上對(duì)照無(wú)菌落的位置)。與圖b圓圈相對(duì)應(yīng)的圖a中的菌落表現(xiàn)型是抗氨芐青霉素但不抗四環(huán)素抗氨芐青霉素但不抗四環(huán)素,這些大腸桿菌中導(dǎo)入了重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】Ⅰ;Ⅱ;堿基互補(bǔ)配對(duì);CaCl2;細(xì)胞壁;普通質(zhì)粒或重組質(zhì)粒;抗氨芐青霉素但不抗四環(huán)素;重組質(zhì)粒
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:42引用:1難度:0.5
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1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( )
A.DNA連接酶具有特異性,只能連接同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割形成的黏性末端 B.若能在植物細(xì)胞中檢測(cè)到相應(yīng)的目的基因,則說(shuō)明基因工程項(xiàng)目獲得成功 C.蛋白質(zhì)工程需構(gòu)建基因表達(dá)載體,改造后的蛋白質(zhì)的性狀可遺傳給后代 D.將抗蟲(chóng)基因整合到某植物的線粒體DNA中,可通過(guò)花粉傳播,從而引起基因污染 發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>
A.質(zhì)粒上標(biāo)記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選 B.目的基因必須整合到受體細(xì)胞的DNA中才能復(fù)制 C.構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需要在目的基因前加上起始密碼子 D.誘變育種和基因工程的原理相同 發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7 -
3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
(4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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