人胰島素基因表達的最初產物是一條肽鏈構成的前胰島素原,經加工后形成兩條肽鏈(A鏈和B鏈)的有生物活性的胰島素。此后科學家又提出了利用基因工程改造大腸桿菌生產人胰島素的兩種方法:“AB”法是根據胰島素A、B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種DNA片段,利用工程菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素;“BCA”法是利用人體某細胞中的mRNA得到胰島素基因,表達出胰島素原后再用特定酶切掉C肽段。這兩種方法使用同一種質粒作為載體。請據圖分析并回答下列問題:

(1)“AB”法中人工合成的兩種DNA片段均有多種可能的序列,原因是 一種氨基酸可能對應多種密碼子一種氨基酸可能對應多種密碼子?!癇CA”法是利用人體 胰島B胰島B細胞中的mRNA,再由mRNA經 逆轉錄逆轉錄得到的胰島素基因,“AB和BCA”“AB和BCA”(填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”)法獲取的目的基因中不含人胰島素基因啟動子。
(2)如圖是利用基因工程生產人胰島素過程中使用的質粒及目的基因的部分結構。為使目的基因與載體正確連接,在設計PCR引物時可將限制酶 XhoⅠ和MunⅠXhoⅠ和MunⅠ的識別序列添加在PCR兩種引物的 5′5′(填“3′”或“5′”)端,PCR開始后,與a鏈相結合的引物上添加的是限制酶 MunⅠMunⅠ的識別序列。若計劃用1個胰島素基因為模板獲得m(m大于2)個胰島素基因,則消耗的引物總量是 2m-22m-2個。
(3)β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal產生藍色物質使菌落呈現藍色,否則菌落為白色。經鈣離子處理大腸桿菌后,與重組質?;旌吓囵B一段時間,將大腸桿菌接種到添加了 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal的培養基上篩選出 白白色的菌落即為工程菌種。
(4)科學家利用蛋白質工程技術,研制出了易吸收、起效快的賴脯胰島素,獲得賴脯胰島素基因的途徑是:從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列。
【考點】基因工程的操作過程綜合;蛋白質工程基本原理.
【答案】一種氨基酸可能對應多種密碼子;胰島B;逆轉錄;“AB和BCA”;XhoⅠ和MunⅠ;5′;MunⅠ;2m-2;氨芐青霉素和X-gal;白;設計預期的蛋白質結構
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/27 10:35:59組卷:45引用:2難度:0.5
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