斑馬魚是一種模式動物，體外受精發育，胚胎透明、便于觀察，可用于水質監測、基因功能分析以及藥物毒性與安全性評價等。
（1）由于人類活動產生的生活污水日益增多，大量未經處理的污水直接排入河流、湖泊會引起水體

富營養化

富營養化

，導致藻類大量繁殖形成水華。取水樣喂養斑馬魚，可用斑馬魚每周的體重和死亡率等指標監測水體污染程度。
（2）為了研究某基因在斑馬魚血管發育過程中的分子調控機制，用DNA連接酶將該基因連接到質粒載體形成

重組DNA分子

重組DNA分子

，導入到大腸桿菌菌株DH5α中。為了能夠連接上該目的基因、并有利于獲得含該目的基因的DH5α陽性細胞克隆，質粒載體應含有

限制性核酸內切酶的識別序列、抗生素抗性基因

限制性核酸內切酶的識別序列、抗生素抗性基因

（答出2點即可）。提取質粒后，采用

顯微注射

顯微注射

法，將該基因導入到斑馬魚受精卵細胞中，培養并觀察轉基因斑馬魚胚胎血管的發育情況。
（3）為了獲取大量斑馬魚胚胎細胞用于藥物篩選，可用

胰蛋白酶

胰蛋白酶

分散斑馬魚囊胚的內細胞團，取分散細胞作為初始材料進行

原代

原代

培養。培養瓶中添加成纖維細胞作為

飼養層細胞

飼養層細胞

，以提高斑馬魚胚胎細胞克隆的形成率。