科學家嘗試使用Cre/loxP位點特異性重組系統，在檢測目的基因導入成功后，刪除轉基因煙草細胞內的抗除草劑基因．其技術過程如下（圖中的■代表基因前的啟動子），據圖回答：
（1）loxP是一種只有34個堿基對構成的小型DNA片段，是有兩個13個堿基對反向重復序列和中間間隔的8個堿基對序列共同組成，自身不會表達，插入質粒后也不影響原有基因的表達，其堿基序列如下：
Cre酶能特異性地識別此序列并在箭頭處切開loxP，其功能類似于基因工程中的限制限制酶．從遺傳學角度分析，Cre酶改變質粒產生的結果相當于可遺傳變異中的基因重組基因重組．
（2）將重組質粒導入到植物細胞中最常用的方法是農桿菌轉化法農桿菌轉化法．作為標記基因，抗除草劑基因用于檢測目的基因是否導入成功的原因是抗除草劑基因和目的基因在同一個質粒上抗除草劑基因和目的基因在同一個質粒上．
（3）經檢測成功后，抗除草劑基因已沒有用途，繼續留在植物體內可能會造成的安全問題是抗除草劑基因可能轉移到雜草中抗除草劑基因可能轉移到雜草中．經Cre酶處理后，質粒中的兩個loxP序列分別被切開后，可得到如上圖右側的這兩個DNA分子．由于抗除草劑基因前沒有了啟動子抗除草劑基因前沒有了啟動子的原因，抗除草劑基因不再表達，之后會在培養過程中消失．
（4）loxP序列是有方向性的．如果經Cre酶處理后，發現抗除草劑基因反向連接在質粒一上，則原來質粒一中這兩個loxP序列的方向是CC．
A．兩個都是正向 B．兩個都是反向
C．一個正向一個反向 D．與方向無關．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制；基因重組；農桿菌轉化法；抗除草劑基因和目的基因在同一個質粒上；抗除草劑基因可能轉移到雜草中；抗除草劑基因前沒有了啟動子；C
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：8引用：2難度：0.5
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
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（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6