幽門螺桿菌（Hp）是慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，該菌的Ipp20基因能合成其特有的蛋白質，據此，研究者利用基因工程制備Hp疫苗。已知Ipp20基因表達時，雙鏈DNA的一條鏈是編碼鏈，另一條鏈是模板鏈，如圖1；四種限制酶及其識別序列如圖2；三種質粒如圖3，箭頭表示限制酶的切割位點；操作步驟如圖4。回答下列問題：
（1）Ipp20基因終止子序列位于圖1中的 非編碼區2非編碼區2區段，該基因轉錄時，編碼起始密碼子的序列位于圖1中的 編碼區編碼區區段。
（2）轉錄產生的mRNA前8個堿基序列為 5′CUCGAGAU5′CUCGAGAU（方向為5′→3′）。若通過PCR技術大量擴增Ipp20基因的編碼區段，則需要設計一對引物，其中結合到編碼鏈上的引物序列是 5′TCTAGAGG5′TCTAGAGG（方向為5′→3′，寫出5′端8個堿基序列）。
（3）據圖1、2、3分析，構建基因表達載體時，應選用的限制酶是 XbaⅠ、XhoⅠXbaⅠ、XhoⅠ，最適合用作載體的質粒是 質粒Z質粒Z。
（4）圖4中為篩選出含有目的基因的大腸桿菌，通常采用影印法（使用無菌的線氈布壓在培養基A的菌落上，帶出少許菌種，平移并壓在培養基B上、結果如圖所示）。培養基A、B中應分別添加 潮霉素、氯霉素潮霉素、氯霉素，符合實驗要求的菌落是 3、53、5（填寫數字），判斷依據是 菌落3、5在含潮霉素培養基中能生長，但在含氯霉素培養基中不能生長，說明含有因插入目的基因而丟失氯霉素抗性基因的重組質粒菌落3、5在含潮霉素培養基中能生長，但在含氯霉素培養基中不能生長，說明含有因插入目的基因而丟失氯霉素抗性基因的重組質粒。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】非編碼區2；編碼區；5′CUCGAGAU；5′TCTAGAGG；XbaⅠ、XhoⅠ；質粒Z；潮霉素、氯霉素；3、5；菌落3、5在含潮霉素培養基中能生長，但在含氯霉素培養基中不能生長，說明含有因插入目的基因而丟失氯霉素抗性基因的重組質粒
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優網所有，未經書面同意，不得復制發布。
發布：2024/4/20 14:35:0組卷：31引用：3難度：0.6
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
相關試卷