抗菌肽具有熱穩定性以及廣譜抗細菌等特點，其廣泛的生物學活性顯示了其在醫學上良好的應用前景。科研工作者將若干編碼抗菌肽（ABP）序列按照首尾相連的方式插在質粒PLG339的布康唑抗性基因內部，形成長度為4800bp（1bp為一個堿基對）的重組質粒PLG339-nABP，相關過程如圖所示。已知重組質粒中，每個編碼ABP序列中都含有限制酶AccⅢ的一個切點，基因trpA的表達產物可使細胞利用無機氮源合成色氨酸（色氨酸是微生物生長必須的氨基酸）。請據圖1回答下列問題：
（1）若PLG339-nABP經限制酶AccⅢ處理后，產生66 bp和4 140 bp兩種長度的DNA片段，則這些DNA片段共有1111個，單個抗菌肽（ABP）最多由2222個氨基酸構成（不考慮終止密碼）。
（2）現有大腸桿菌和酵母菌兩種菌群，可作為導入PLG339-nABP的受體細胞的是酵母菌酵母菌，理由是抗菌肽具有殺滅細菌的作用（不能殺滅酵母菌）抗菌肽具有殺滅細菌的作用（不能殺滅酵母菌）。
（3）若選定的受體細胞為trpA基因缺陷型，則需采用兩步法篩選含重組質粒的細胞。第一步篩選的固體培養基在營養成分上的要求是含無機氮源而不含色氨酸含無機氮源而不含色氨酸，第二步采用“影印法”，將第一步所得菌落轉移到新的培養基上進行培養，該培養基中應添加布康唑布康唑。通過對照，最終選出能在第一步培養基上生長，而不能在第二步培養基上生長的菌落即為符合要求的成功導入重組質粒的細胞。
（4）在測試轉基因表達產物ABP對金黃色葡萄球菌的殺菌效果時獲得了如圖2所示的結果，據此可獲得的結論是ABP抑菌效果與ABP的濃度濃度和金黃色葡萄球菌的不同培養時期/天數不同培養時期/天數有關。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】11；22；酵母菌；抗菌肽具有殺滅細菌的作用（不能殺滅酵母菌）；含無機氮源而不含色氨酸；布康唑；濃度；不同培養時期/天數
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：1難度：0.6
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