胰島素對治療糖尿病有積極的作用，為了批量生產人胰島素，科學家提出了兩種通過基因工程改造大腸桿菌來生產人胰島素的方法。
一、AB法：根據胰島素A、B兩條肽鏈人工合成兩種DNA片段，利用大腸桿菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素；
二、BCA法：利用胰島B細胞中的mRNA得到胰島素基因，導入大腸桿菌獲得胰島素。這兩種方法使用同一種質粒作為載體。如圖為過程中使用的質粒及目的基因的部分結構，請回答下列問題。
（1）該項技術操作時不選用EcoRⅠ切割質粒的原因是 EcoRl會同時破壞兩種標記基因，無法實現對重組DNA分子的篩選EcoRl會同時破壞兩種標記基因，無法實現對重組DNA分子的篩選。
（2）將人的胰島素基因導入大腸桿菌，需要先構建由啟動子、目的基因、標記基因、終止子等組成的重組質粒，該過程為基因工程的核心，稱為 基因表達載體的構建基因表達載體的構建，其中啟動子的作用是 RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因轉錄出mRNARNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因轉錄出mRNA。以上 AB和BCAAB和BCA（填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”）法獲取的目的基因中不含人胰島素基因啟動子。
（3）要使目的基因與載體正確連接，需在PCR引物上添加相應限制酶的識別序列。已知胰島素基因左端①處的堿基序列為5′-CCTTTCAGCTCA-3'，則其中一種引物設計的序列是 BB。
A．5′-CTCGAGGGAAAGTCGAGT-3'
B．5'-CTCGAGCCTTTCAGCTCA-3'
C．5'-CAATTGGGAAAGTCGAGT-3'
D．5′-CAATTGCCTTTCAGCTCA-3'
（4）β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal產生藍色物質使菌落呈現藍色，否則菌落為白色。大腸桿菌經 鈣離子鈣離子處理后，與重組質粒混合培養一段時間，再接種到添加了 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal的培養基上，篩選出 白色白色的菌落即為工程菌種。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】EcoRl會同時破壞兩種標記基因，無法實現對重組DNA分子的篩選；基因表達載體的構建；RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因轉錄出mRNA；AB和BCA；B；鈣離子；氨芐青霉素和X-gal；白色
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優網所有，未經書面同意，不得復制發布。
發布：2024/7/4 8:0:9組卷：12引用：2難度：0.6
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7