徑柳匙葉草是一種泌鹽植物。科研工作者將徑柳匙葉草的TaNHX2基因轉移到棉花細胞內，獲得了轉基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段，圖中箭頭所指為Sau3AI、EcoRI、BamHI三種限制酶的切點；圖2是三種限制酶的識別序列與酶切位點示意圖；圖3是農桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質粒結構示意圖，請分析回答問題：
（1）基因工程的核心步驟是 基因表達載體的構建基因表達載體的構建。
（2）將含有徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導入受體菌的群體中儲存，再根據TaNHX2基因的特定核苷酸序列從中提取圖1的片段，此法為從 基因文庫基因文庫獲取目的基因。此外也可利用PCR技術擴增TaNHX2基因，需要加入的酶是 Taq酶Taq酶，反應的溫度和時間需根據具體情況進行設定，55～60℃有利于 引物引物結合到互補DNA鏈上。
（3）若用BamHⅠ切割圖1所示的DNA片段，獲得目的基因，則需選用限制酶 Sau3AⅠSau3AⅠ切割圖3所示質粒，該方案的缺陷是 目的基因或質粒自身環化（或目的基因在質粒上的連接方向不確定）目的基因或質粒自身環化（或目的基因在質粒上的連接方向不確定）（答出一點即可）。
（4）目的基因是否成功轉錄出了mRNA，常用 分子雜交分子雜交的方法進行檢測，為了檢測技術成果，科研工作者將轉基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長狀況，這屬于 個體個體水平的檢測。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因表達載體的構建；基因文庫；Taq酶；引物；Sau3AⅠ；目的基因或質粒自身環化（或目的基因在質粒上的連接方向不確定）；分子雜交；個體
【解答】
【點評】
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發布：2024/8/9 8:0:9組卷：1引用：1難度：0.5
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