矮牽牛是一種常用的園林綠化植物。研究人員利用農桿菌轉化法將外源基因D轉入到矮牽牛細胞中，最終獲得了能開藍花的矮牽牛。如圖為Ti質粒和目的基因的部分結構模式圖，以及限制酶1、酶2、酶3的酶切位點。請回答：
（1）Ti質粒由Con區段、Vir區段、T-DNA區段、啟動子等組件構成。啟動子的作用是與RNA聚合酶結合并驅動基因的轉錄與RNA聚合酶結合并驅動基因的轉錄。通過農桿菌轉化法，最終將基因D整合到植物細胞的染色體DNA染色體DNA上。
（2）研究發現，農桿菌在酚類物質的作用下產生酶（甲），該酶識別T-DNA區段并將其中的一條鏈切割下來，TDNA單鏈進入植物細胞并在受體細胞酶的作用下形成雙鏈。甲不屬于不屬于（填“屬于”或“不屬于”）限制酶，理由是限制酶能識別雙鏈DNA并斷開DNA的雙鏈，甲只能切割T-DNA的一條鏈限制酶能識別雙鏈DNA并斷開DNA的雙鏈，甲只能切割T-DNA的一條鏈。有學者認為，在酚類物質的作用下，酶甲的合成只與Vir區段中的基因有關，與Con區段無關。用實驗驗證該觀點是否正確，合理的實驗設計思路是將分別剔除了Vir和Con區段的Ti質粒轉入到農桿菌中，在含有酚類物質的培養基上培養農桿菌并檢測細胞中有無甲的產生將分別剔除了Vir和Con區段的Ti質粒轉入到農桿菌中，在含有酚類物質的培養基上培養農桿菌并檢測細胞中有無甲的產生（寫出實驗思路即可）。
（3）在植物組織培養過程中，外植體細胞恢復分裂能力并形成愈傷組織的過程稱作脫分化脫分化。研究發現，T-DNA中含有生長素基因（tms）和細胞分裂素基因（tmr）這些基因能在植物細胞中大量表達并影響愈傷組織細胞的增殖和分化。為消除T-DNA中tms、tmr對轉基因矮牽牛的影響，在酶1、酶2、酶3中，用于構建表達載體的限制酶酶1和酶2酶1和酶2。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】與RNA聚合酶結合并驅動基因的轉錄；染色體DNA；不屬于；限制酶能識別雙鏈DNA并斷開DNA的雙鏈，甲只能切割T-DNA的一條鏈；將分別剔除了Vir和Con區段的Ti質粒轉入到農桿菌中，在含有酚類物質的培養基上培養農桿菌并檢測細胞中有無甲的產生；脫分化；酶1和酶2
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：39引用：2難度：0.7
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（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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