科研小組利用基因工程技術將“抗蟲基因”轉入棉花細胞成功培育出抗蟲棉，該技術所用的含“抗蟲基因”的DNA與質粒上相關限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示（不同限制酶的識別序列和酶切位點：BamHⅠ5'-G↓GATCC-3'，BclⅠ5'-T↓GATCA-3'，Sau3AⅠ5'-↓GATC-3'，HindⅢ5'-A↓AGCTT-3'）。請分析并回答以下問題：
（1）將抗蟲基因轉入棉花細胞前，可以通過PCR擴增獲得大量抗蟲基因，PCR擴增抗蟲基因的前提是要測定該基因兩端部分核苷酸序列，目的是 便于合成引物便于合成引物。PCR每次循環都包括變性、復性復性和延伸三步。
（2）由圖1和圖2分析可知，研究人員應選擇 HindIII和Sau3AIHindIII和Sau3AI限制酶處理含抗蟲基因的DNA片段，在處理質粒的時候應選擇 HindIII和BamHIHindIII和BamHI限制酶。質粒DNA中含有的啟動子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別并結合的位點。
（3）蛋白酶抑制劑基因也是一種抗蟲基因，某研究團隊將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨或共同轉化，獲得轉基因植株。
①將抗蟲基因轉入植物體內時，除了采用我國科學家獨創的花粉管通道法，還可以采用 農桿菌轉化農桿菌轉化法，使用該方法時，應將抗蟲基因插入到質粒的 T-DNAT-DNA區域。
②標記基因可用于檢測目的基因是否導入，由圖2可知，應選含有 X抗生素X抗生素的培養基篩選含有重組質粒的細胞。
③圖3為將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨或共同轉化的實驗結果，據結果分析，NaPINaPI（選填“NaPI”或“Stpin1A”或“NaPI+Stpin1A”）轉基因棉花的抗蟲效果最佳，得出該結論的原因是 飼喂NaPI轉基因植物的蟲體質量較差，且每株棉鈴蟲數較最少飼喂NaPI轉基因植物的蟲體質量較差，且每株棉鈴蟲數較最少。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】便于合成引物；復性；HindIII和Sau3AI；HindIII和BamHI；RNA聚合酶；農桿菌轉化；T-DNA；X抗生素；NaPI；飼喂NaPI轉基因植物的蟲體質量較差，且每株棉鈴蟲數較最少
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：4引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6