抗凝血酶Ⅲ蛋白是一種血漿糖蛋白，臨床上主要用于血液性疾病的治療。凝乳酶是奶酪生產中的關鍵性酶。下列是生產這兩種酶的相關思路，請回答下列問題：
（1）圖1為通過培育轉基因奶牛獲得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程。
①圖中過程a指的是利用顯微注射顯微注射法將抗凝血酶Ⅲ蛋白基因導入受精卵。受體細胞不選用體細胞的理由是動物體細胞的全能型一般不能表現出來動物體細胞的全能型一般不能表現出來。
②b為早期胚胎培養和胚胎移植，在胚胎移植前，需進行性別鑒定性別鑒定，目的是確定要培育的個體能產牛奶。
③可采用抗原-抗體雜交法來鑒定轉基因牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白。該方法需要使用抗凝血酶Ⅲ蛋白的單克隆抗體，請寫出制備該抗體的實驗思路向小鼠體內注射現成的（標準的/純化后的）抗凝血酶Ⅲ蛋白；提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，經多次篩選獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞；對雜交瘤細胞擴增培養獲取大量的單克隆抗體向小鼠體內注射現成的（標準的/純化后的）抗凝血酶Ⅲ蛋白；提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，經多次篩選獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞；對雜交瘤細胞擴增培養獲取大量的單克隆抗體。
（2）從牛胃液中分離得到的凝乳酶以其催化能力強而被廣泛應用，研究人員運用基因工程技術，將編碼該酶的基因轉移到了微生物細胞中。
①從牛胃細胞中提取mRNA，再通過逆轉錄逆轉錄形成cDNA．以此cDNA為模板通過PCR擴增目的基因，有時需要在引物的5'端設計限制酶限制酶（填“限制酶”/“DNA連接酶”/“RNA聚合酶”）的識別序列，以便構建重組DNA分子。
②為提高重組DNA分子的比例，在構建重組DNA分子（如圖2所示）時最好選用BamHⅠ和PstⅠBamHⅠ和PstⅠ作限制酶。
③經研究發現，如果將該凝乳酶的第20位和24位氨基酸變為半胱氨酸，則其催化能力將提高2倍。現已知通過蛋白質工程可生產高效凝乳酶，應直接改造的是凝乳酶基因凝乳酶基因（凝乳酶蛋白/凝乳酶mRNA/凝乳酶基因）。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】顯微注射；動物體細胞的全能型一般不能表現出來；性別鑒定；向小鼠體內注射現成的（標準的/純化后的）抗凝血酶Ⅲ蛋白；提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，經多次篩選獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞；對雜交瘤細胞擴增培養獲取大量的單克隆抗體；逆轉錄；限制酶；BamHⅠ和PstⅠ；凝乳酶基因
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：13引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6