糖化酶是將淀粉轉化為葡萄糖的酶，大部分野生酵母菌因缺乏糖化酶基因而不能直接利用淀粉。研究人員將經誘變處理后獲取的黑曲霉菌高產糖化酶基因導入畢赤酵母GS115（對氨芐青霉素不敏感）中，構建能直接利用淀粉的工程菌，該過程所用質粒（僅示部分結構）如圖1所示。質粒的外側鏈為a鏈，內側鏈為b鏈。基因Ampr轉錄的模板鏈屬于b鏈的片段。三種限制酶的識別序列及切割位點見下表。請回答下列問題。
（1）為獲得糖化酶高產菌株，研究人員將經誘變處理后的黑曲霉菌接種到 淀粉淀粉含量高的培養基上，恒溫培養適宜時間后滴加碘液，挑選出透明圈（不產生藍色）直徑 較大較大（填“較大”或“較小”）的菌株。再進行復篩以及穩定性遺傳實驗。
（2）質粒復制的模板鏈是 a和ba和b（選填“a”、“b”、“a和b”、“a或b”）鏈。高產糖化酶基因插入質粒后，其轉錄的模板鏈屬于 aa鏈的片段。
| 限制酶 | BamHⅠ | PstⅠ | XbaⅠ | |
| 識別序列和切割位點（5'→3'） | G↓GATCC | C↓TGCAG | T↓CTAGA | |
|
相關結構： PAOXI：甲醇誘導型強啟動子 TAOXI：終止子 HIS4：組氨酸脫氫酶基因，其表達產物催化組氨酸合成 Orl：復制原點 Ampr：氨芐青霉素抗性基因 |
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BamHI和XbaI
BamHI和XbaI
（BamHⅠ/PstⅠ/XbaⅠ）酶識別序列，則PCR擴增時引物的減基序列為 ①④
①④
。（多選）
①5'-TCTAGATCTGTTGAAT-3'②5'-TCTAGAAGACAACTTA-3'
③5'-CTGCAGCTTGGATGAT-3'④5'-GGATCCCTTGGATGAT-3'
⑤5'-GGATCCGAACCTACTA-3'⑥5'-CTCGAGTCTGTTGAAT-3'
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】淀粉；較大；a和b；a；BamHI和XbaI；①④
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/28 8:0:9組卷：18引用：2難度：0.5
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