Rag₂基因缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞。科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)Rag₂基因缺失的小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖：

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）步驟①中，在核移植前應(yīng)將卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到

減數(shù)第二次分裂中期（或MII期）

減數(shù)第二次分裂中期（或MII期）

（填具體時(shí)期）。步驟②中。重組胚胎培養(yǎng)時(shí)需要添加CO₂，CO₂的主要作用是

維持培養(yǎng)液的pH

維持培養(yǎng)液的pH

。
（2）ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為

體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯

體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯

，在功能上

具有發(fā)育的全能性

具有發(fā)育的全能性

。體外誘導(dǎo)ES細(xì)胞分化時(shí)，通常需要添加

分化誘導(dǎo)因子（或牛磺酸、丁酰環(huán)腺苷酸）

分化誘導(dǎo)因子（或牛磺酸、丁酰環(huán)腺苷酸）

。
（3）步驟③中，如獲取的Rag₂基因數(shù)量較少，需利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，當(dāng)Taq酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成時(shí)，需加熱至

70～75

70～75

℃。
（4）為檢測(cè)Rag₂基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可利用

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

技術(shù)檢測(cè)。治療成功后，淋巴細(xì)胞會(huì)在

骨髓、胸腺

骨髓、胸腺

中成熟。