幽門螺桿菌（Hp）是消化性潰瘍、慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，Hp可產生極為豐富的高活性的脲醇，免疫接種對Hp感染具有預防作用。研究者利用基因工程制備Hp疫苗的部分流程如圖所示，圖中①一④代表實驗步驟；bp代表堿基對；Ampr代表氨芐西林抗性基因，▼代表限制酶的酶切位點；酶1與酶2識別不同的核苷酸序列。回答下列問題；
（1）采用PCR技術擴增lpp20基因時，需要加入DNA聚合酶，其作用是 催化合成DNA子鏈催化合成DNA子鏈。通過控制 溫度溫度使DNA復制在體外反復進行。在實際操作時，加入四種脫氧核苷三磷酸作為DNA復制的原料，每接入一個核苷酸，伴隨若兩個特殊化學鍵斷裂。
（2）質粒pZY的作用是 將目的基因（lpp20基因）導入大腸桿菌將目的基因（lpp20基因）導入大腸桿菌。在步驟③中一般先用Ca2+處理大腸桿菌細胞，原因是 經Ca2+處理的大腸桿菌吸收周圍環境中DNA分子的能力增強經Ca2+處理的大腸桿菌吸收周圍環境中DNA分子的能力增強。
（3）步驟②中，已知在氨芐西林抗性基因內有一段堿基序列
，則圖中酶1和酶2的最佳組合是 HindⅢ和XbaⅠHindⅢ和XbaⅠ（注；SpeⅠ：A↓CTAGT；HindⅢ：A↓AGCTT；XbaⅠ：T↓CTAGA）。步驟④中使用含氨芐青霉素的培養基培養，目的是 將含目的基因（lpp20基因）的大腸桿菌細胞篩選出來將含目的基因（lpp20基因）的大腸桿菌細胞篩選出來。
（4）臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp,其基本原理是； Hp產生的脲酶能將14C標記的尿素分解為氨和12CO2Hp產生的脲酶能將14C標記的尿素分解為氨和12CO2。
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】催化合成DNA子鏈；溫度；將目的基因（lpp20基因）導入大腸桿菌；經Ca2+處理的大腸桿菌吸收周圍環境中DNA分子的能力增強；HindⅢ和XbaⅠ；將含目的基因（lpp20基因）的大腸桿菌細胞篩選出來；Hp產生的脲酶能將14C標記的尿素分解為氨和12CO2
【解答】
【點評】
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