雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細胞因子，廣泛用于動物領域的抗病毒治療。科研人員將雞干擾素基因作為目的基因，構建基因表達載體，通過農桿菌介導法導入煙草，以獲得抗病毒煙草。如圖為科研人員制備能合成雞干擾素的煙草愈傷組織細胞的流程，①-④表示相關的操作，兩種限制酶的識別序列及切割位點如表所示。請回答下列問題：
| 限制酶 | 識別序列和切割位點 |
| EcoRⅠ |  |
| BamHⅠ |
|
雞干擾素基因兩端的部分核苷酸序列
雞干擾素基因兩端的部分核苷酸序列
。科研人員還在兩種引物的一端分別加上了 GAATTC
GAATTC
和 GGATCC
GGATCC
序列，以便于后續的剪切和連接。（2）步驟②所構建的基因表達載體中末標注出的必需元件還有
復制原點
復制原點
，步驟③中需先用 Ca2+
Ca2+
處理農桿菌以便將基因表達載體導入細胞。（3）步驟④中，科研人員提取愈傷組織細胞的RNA后，先通過逆轉錄獲得DNA，再通過PCR擴增制備探針，若最終未能檢測出干擾素基因，其可能原因是
雞干擾素基因未能導入煙草愈傷組織細胞（或導入煙草愈傷組織細胞的雞干擾素基因未能轉錄）
雞干擾素基因未能導入煙草愈傷組織細胞（或導入煙草愈傷組織細胞的雞干擾素基因未能轉錄）
。（4）用煙草花葉病毒對獲得的轉基因煙草和普通煙草進行接種實驗，接種后第19天對照組植株進入病情指數（植物受病毒侵染的嚴重程度）為100的平臺期，而轉基因植株在第
22
22
天才進入平臺期，但此時的病情指數為79，說明轉基因煙草植株對病毒的侵染表現出一定的抗性，但抗性較低，可能的原因有 實驗得到的干擾素表達量較低，未能很好啟動機體產生抗性
實驗得到的干擾素表達量較低，未能很好啟動機體產生抗性
。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】雞干擾素基因兩端的部分核苷酸序列；GAATTC；GGATCC；復制原點；Ca2+；雞干擾素基因未能導入煙草愈傷組織細胞（或導入煙草愈傷組織細胞的雞干擾素基因未能轉錄）；22；實驗得到的干擾素表達量較低，未能很好啟動機體產生抗性
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：3難度：0.6
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1．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質工程”）。可利用定點突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉基因植物。
（2）PCR過程所依據的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發現培育的該轉基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
2．數字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7