通過咽拭子取樣進行 RT-PCR 技術檢測是目前臨床上診斷新型冠狀病毒感染疑似患者的常用方法,用于核酸檢測的 RT-PCR 試劑盒的部分工作原理簡圖如圖。回答下列問題:

(1)RT-PCR 是指以病毒的 RNA 為模板通過逆轉錄逆轉錄過程合成 cDNA,并對 cDNA 進行 PCR 擴增的過程。PCR 擴增時,退火溫度的設定是成敗的關鍵。退火溫度過高會破壞引物引物與模板模板的堿基配對。退火溫度的設定與引物長度、堿基組成有關,長度相同但G-CG-C含量高的引物需要設定更高的退火溫度。
(2)利用 RT-PCR 試劑盒對新型冠狀病毒進行檢測時,除借助上述 RT-PCR 技術外,還需要有特異性探針,利用該探針對新型冠狀病毒進行檢測的原理是分子雜交分子雜交。
(3)除核酸檢測外,研究人員還研發了基于病毒蛋白的檢測技術,該項技術的關鍵是生產出能與新冠病毒結合的特異性抗體。生產該種抗體的大致方案如下:
①向小鼠體內注射新冠病毒的抗原蛋白;②分離免疫小鼠的 B 淋巴細胞,并與小鼠的骨髓瘤細胞融合,多次篩選、檢測,最終獲得所需雜交瘤細胞;③將獲得的雜交瘤細胞在體外條件下做大規模培養,獲得大量的特異性抗體。
上述生產抗體的方案中使用的技術手段有動物細胞培養、動物細胞融合動物細胞培養、動物細胞融合;其中步驟②中經多次篩選、檢測后遭淘汰的細胞有B細胞、骨髓瘤細胞及B-B型、瘤-瘤型融合細胞B細胞、骨髓瘤細胞及B-B型、瘤-瘤型融合細胞; 步驟③大規模培養時要注意定期更換培養液,其目的是防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害。獲得雜交瘤細胞后,常用的培養方法除了體外培養,還有注射到小鼠腹腔內增殖注射到小鼠腹腔內增殖。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定;單克隆抗體及其應用.
【答案】逆轉錄;引物;模板;G-C;分子雜交;動物細胞培養、動物細胞融合;B細胞、骨髓瘤細胞及B-B型、瘤-瘤型融合細胞;防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害;注射到小鼠腹腔內增殖
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/27 10:35:59組卷:12引用:3難度:0.7
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