葡激酶（SAK）是由金黃色葡萄球菌分泌的一種纖溶酶原激活物，它可以激活人體中的血纖維蛋白溶酶原形成血纖維蛋白溶酶，從而溶解血栓。研究人員嘗試將SAK基因導入到番茄中，利用轉基因番茄生產有生物學活性的SAK．回答下列問題：
（1）目的基因可從基因文庫中獲取，與基因組文庫相比，cDNA文庫具有的特點：cDNA文庫比較小，無啟動子和內含子，只含部分基因，物種間可進行基因交流cDNA文庫比較小，無啟動子和內含子，只含部分基因，物種間可進行基因交流（答出兩點）。利用PCR技術擴增目的基因時需要兩種引物，原因是 DNA聚合酶只能從3端延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時擴增DNA聚合酶只能從3端延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時擴增。
（2）構建基因表達載體時，常使用兩種不同的限制酶分別切割目的基因和Ti質粒，該過程不使用同一種限制酶的原因是 防止質粒自身環化、保證目的基因與Ti質粒正確連接防止質粒自身環化、保證目的基因與Ti質粒正確連接。
（3）含有SAK基因的表達載體構建成功后，接下來依次完成 將表達載體轉入農桿菌將表達載體轉入農桿菌、將含有Ti質粒的農桿菌導入植物細胞將含有Ti質粒的農桿菌導入植物細胞和 將導入成功的植物細胞進行組織培養將導入成功的植物細胞進行組織培養等步驟才能獲得轉基因植株。檢測轉基因植株中的SAK基因是否表達成功，通常采用的方法是 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】cDNA文庫比較小，無啟動子和內含子，只含部分基因，物種間可進行基因交流；DNA聚合酶只能從3端延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時擴增；防止質粒自身環化、保證目的基因與Ti質粒正確連接；將表達載體轉入農桿菌；將含有Ti質粒的農桿菌導入植物細胞；將導入成功的植物細胞進行組織培養；抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：10引用：1難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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