泡膜運(yùn)輸是介導(dǎo)真核細(xì)胞蛋白質(zhì)分泌途徑的主要方式。科學(xué)家已經(jīng)成功鑒定出三種運(yùn)輸小泡：網(wǎng)格蛋白有被小泡，COPⅠ有被小泡和COPⅡ有被小泡。其中COPⅠ有被小泡上的ε-COP蛋白在高爾基體內(nèi)部以及高爾基體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)之間的蛋白質(zhì)運(yùn)輸中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。科學(xué)家通過一定的技術(shù)手段，制備了水稻ε-COP蛋白的單克隆抗體。
（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增水稻ε-COP蛋白基因，PCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，主要成分包括：DNA模板、2種引物2種引物，4種脫氧核苷酸和TaqDNA聚合酶TaqDNA聚合酶。
（2）研究人員通過一定的技術(shù)手段，將ε-COP蛋白基因與運(yùn)載體結(jié)合，得到如圖所示重組表達(dá)載體，據(jù)圖分析：
①該重組表達(dá)載體用到的限制酶是BamHI和XhoIBamHI和XhoI。研究人員將其導(dǎo)入大腸桿菌常用方法是CaCl2轉(zhuǎn)化法CaCl2轉(zhuǎn)化法。
②接下來研究人員將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種在含有氨芐青霉素（Amp）氨芐青霉素（Amp）的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間，長出的菌落即為轉(zhuǎn)化成功的大腸桿菌。
③研究人員以大腸桿菌作為受體細(xì)胞，相對酵母菌而言，具有結(jié)構(gòu)簡單、繁殖快、易培養(yǎng)、遺傳物質(zhì)相對較少、外源蛋白表達(dá)量高結(jié)構(gòu)簡單、繁殖快、易培養(yǎng)、遺傳物質(zhì)相對較少、外源蛋白表達(dá)量高（答出兩點即可）等優(yōu)點。
（3）利用聚丙烯酰胺凝膠電泳將重組水稻ε-COP蛋白提純后，取適量重組蛋白分多次皮下注射家兔，10天后大量采血收集抗血清。注射的重組蛋白相當(dāng)于抗原抗原，多次注射的目的是：產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞，分泌更多抗體產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞，分泌更多抗體。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】2種引物；TaqDNA聚合酶；BamHI和XhoI；CaCl2轉(zhuǎn)化法；氨芐青霉素（Amp）；結(jié)構(gòu)簡單、繁殖快、易培養(yǎng)、遺傳物質(zhì)相對較少、外源蛋白表達(dá)量高；抗原；產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞，分泌更多抗體
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：12引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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