人血清白蛋白（HSA）主要在肝臟中合成，具有重要的醫用價值。為制備大量的HSA，以基因工程技術獲取重組HSA的兩條途徑如圖1所示；圖2中的甲為獲取的含有目的基因（HSA基因）的DNA片段，Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ為三種限制酶，圖中箭頭所指為三種限制酶的酶切位點；圖乙是三種限制酶的識別序列與酶切位點示意圖；圖丙是Ti質粒結構示意圖?；卮鹣铝袉栴}：
（1）從人體細胞中直接提取的HSA基因，導入到大腸桿菌細胞中不能表達，原因可能是 真核基因啟動子不能被原核RNA聚合酶識別，轉錄不能正確起始；且從真核基因組克隆的基因含有內含子，大腸桿菌中沒有轉錄后剪接系統真核基因啟動子不能被原核RNA聚合酶識別，轉錄不能正確起始；且從真核基因組克隆的基因含有內含子，大腸桿菌中沒有轉錄后剪接系統。為了獲得能在大腸桿菌細胞中表達的HSA基因，可從人體的 肝臟肝臟細胞中提取mRNA，通過反轉錄獲得cDNA（雙鏈），再利用PCR進行擴增，該過程需向反應體系中加入 模板DNA模板DNA、Taq聚合酶Taq聚合酶、4種脫氧核苷酸、引物和Mg2+，若擴增后得到了32個HSA基因，則該過程共需要 6262個引物。
（2）構建基因表達載體時，不能選擇限制酶Sau3AⅠ切割目的基因，原因是 限制酶Sau3AⅠ切割目的基因會破壞目的基因限制酶Sau3AⅠ切割目的基因會破壞目的基因，為了防止目的基因與質粒間的任意連接，應選擇限制酶Sau3AⅠ、EcoRⅠ切割質粒，選擇限制酶 BamHⅠ、EcoRⅠBamHⅠ、EcoRⅠ充分切割目的基因，質粒上抗生素抗性基因的作用是 對目的基因是否導入進行檢測對目的基因是否導入進行檢測。
（3）將目的基因導入大腸桿菌時，常用 Ca2+Ca2+處理細胞。為了檢測水稻胚乳細胞中是否合成了HSA蛋白，可用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法；若胚乳細胞中含有HSA基因，但是檢測不到HSA蛋白，原因可能是 目的基因前后的啟動子和終止子設計不理想，導致目的基因不能正常表達目的基因前后的啟動子和終止子設計不理想，導致目的基因不能正常表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】真核基因啟動子不能被原核RNA聚合酶識別，轉錄不能正確起始；且從真核基因組克隆的基因含有內含子，大腸桿菌中沒有轉錄后剪接系統；肝臟；模板DNA；Taq聚合酶；62；限制酶Sau3AⅠ切割目的基因會破壞目的基因；BamHⅠ、EcoRⅠ；對目的基因是否導入進行檢測；Ca2+；抗原-抗體雜交；目的基因前后的啟動子和終止子設計不理想，導致目的基因不能正常表達
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：47難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
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（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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