生物柴油作為新型能源已經成為世界上應用最廣泛、發展迅猛的可再生能源之一。研究人員利用基因工程的方法，將油料作物紫蘇的產油基因DGAT1與含有氨芐青霉素抗性基因的pMD克隆質粒構建pMD—DGAT1重組質粒，然后導入大腸桿菌擴大培養；再提取出擴增的pMD—DGAT1克隆質粒，與pBI121空載體同時用XbaI、BamH I兩種酶酶切，構建pBI121—DGAT1表達載體：最后將表達載體導入四尾柵藻獲得產油微藻，利用地熱廢水培養產油微藻不僅能生產生物柴油，還能治理地熱廢水。
（1）提取紫蘇組織細胞RNA經過逆轉錄逆轉錄得到cDNA，再利用PCR技術擴增得到DGAT1基因。在PCR擴增之前，需要對DGAT1基因進行一次預變性的目的是提高DGAT1基因的變性概率提高DGAT1基因的變性概率；在擴增DGAT1基因時，需要根據DGAT1基因兩端核苷酸序列DGAT1基因兩端核苷酸序列設計特異性引物序列。
（2）在配制培養大腸桿菌的培養基時，要在培養基滅菌并冷卻到30℃左右后，加入用無菌水配制的適宜濃度的氨芐青霉素溶液，氨芐青霉素不能與培養基一同滅菌的原因可能是高溫會破壞氨芐青霉素的結構而導致失效高溫會破壞氨芐青霉素的結構而導致失效。
（3）將DGAT1基因插入到pBI121空載體的啟動子與終止子之間的目的是保證DGAT1基因能在產油微藻細胞中表達保證DGAT1基因能在產油微藻細胞中表達。若用DGAT1基因探針檢測產油微藻，能檢測到細胞中的DGAT1基因及其轉錄出的mRNADGAT1基因及其轉錄出的mRNA；判斷產油微藻細胞中DGAT1基因是否成功表達，需要加入DGAT1抗體DGAT1抗體進行檢測。
（4）為檢測產油微藻對地熱廢水的去污能力，研究人員設計實驗并得到相應實驗結果如表。
| 指標 | 總氮（mg/L） | 總磷（mg/L） | 氟化物（mg/L） |
| 廢水培養基 | 23.2 | 4.32 | 4.56 |
| 培養轉基因產油微藻11天后 | 1.9 | 0.45 | 0.84 |
添加用地熱廢水培養四尾柵藻的對照組，11天后檢測總氮、總磷和氟化物的含量
添加用地熱廢水培養四尾柵藻的對照組，11天后檢測總氮、總磷和氟化物的含量
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄；提高DGAT1基因的變性概率；DGAT1基因兩端核苷酸序列；高溫會破壞氨芐青霉素的結構而導致失效；保證DGAT1基因能在產油微藻細胞中表達；DGAT1基因及其轉錄出的mRNA；DGAT1抗體；添加用地熱廢水培養四尾柵藻的對照組，11天后檢測總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：24引用：3難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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