傳染病是一種由能在生物體之間傳遞的病原體引起的疾病，它會(huì)擾亂生物體的穩(wěn)態(tài)，而確定病原體的種類至關(guān)重要。19世紀(jì)晚期，科赫在尋找炭疽病的病原體時(shí)建立并公布了他的實(shí)驗(yàn)步驟（如圖所示）。該方法也被廣泛用來證明某一特定的病原體會(huì)引發(fā)特定的疾病。回答下列問題：
（1）科赫配制的人工培養(yǎng)基的成分一般包括

碳源、氮源、水、無機(jī)鹽

碳源、氮源、水、無機(jī)鹽

，步驟2中純化病原體時(shí)，使用的接種工具是

接種環(huán)

接種環(huán)

，在平板上進(jìn)行操作時(shí)存在“首尾相接”現(xiàn)象，即下一次操作從上一次的末端開始，目的是

將聚集的菌體逐步稀釋，以獲得單個(gè)菌落

將聚集的菌體逐步稀釋，以獲得單個(gè)菌落

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（2）兩次培養(yǎng)必須保證純培養(yǎng)，需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

，目的是

保證無菌環(huán)境

保證無菌環(huán)境

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（3）在步驟4中通過觀察菌落的

大小、顏色、形狀、隆起程度、邊緣形狀

大小、顏色、形狀、隆起程度、邊緣形狀

（答出2個(gè)）等特征，可以基本確定病原微生物與原病原體一致。
（4）科赫的實(shí)驗(yàn)也存在一定的局限性，如某些病原體無法在人工培養(yǎng)基的培養(yǎng)環(huán)境中生長(zhǎng)，原因可能是

有些病原體屬于病毒，病毒只能寄生在活細(xì)胞中才能代謝和繁殖

有些病原體屬于病毒，病毒只能寄生在活細(xì)胞中才能代謝和繁殖

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